上海仁捷介绍ELISA试剂盒操作步骤

　　ELISA是一种敏感性高、特异性强、重复性好的实验诊断方法，由于其试剂稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素，以及既适宜于大规模筛查试验又可以用于少许标本的检测，既可以做定性试验也可以做定量分析等优点，已广泛应用于微生物学、寄生虫学、肿瘤学和细胞因子等领域。ELISA实验广泛运用在免疫学检验的各领域中。进行ELISA试验就须用到试剂盒，在实验中操作过程是非常重要的，下面我们就来简单介绍一下ELISA试剂盒操作步骤：

　　1、取出试剂盒室温平衡 0min，取出血样放至室温；

　　2、配标准品：取150uL标准品加入150uL标准品稀释液稀释，依次稀释5次；

　　、加样：分别于各反应孔中加入标准品50uL，样品40UL，标准品做复孔，样品做 孔；

　　4、分别于样品孔中加入10UL抗体；

　　5、标准品和样品孔中分别加入50uL链酶亲和素-HRP，盖上封板膜,轻轻震荡混匀， 7℃温育60min；

　　6、配洗涤液：将 0倍浓缩洗涤液用蒸馏水 0倍稀释后备用；

　　7、洗涤：小心揭开封板膜，弃去液体，甩干，每孔加200uL洗涤液，静置 0s后弃去，如此重复5次，拍干；

　　8、显色：每孔先加入显色剂A 50uL，再加显色剂B 50uL，轻轻震荡混匀， 7℃避光显色6min；

　　9、终止：每孔加入终止液50uL，终止反应（此时蓝色立即转为黄色）；

　　10、测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度。测定应在加终止液10min以内进行；

　　11、保存结果，整理桌面；

　　12、分析处理数据。

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