杰辉博高血清相关问题答疑
血清中沉淀物的出现有许多种缘由,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的缘由之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。若欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。最好不使用过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。
血清保存和解冻方法
血清保存方法:我们建议血清应保存在-5℃至-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
血清解冻方法:将血清从冷冻箱取出后,先置于2——8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解进程中必须规则地摇晃均匀。
血清的保存问题:
1、问:2006年6月到期的GIBCO胎牛血清到2007年5月还能用吗?
答:只有试试了,如果一直在-20℃冻着来者,应该还可以,先少用点看看。养细胞系应当没问题,原代不行。
2、问:请问我自然溶化好的胎牛血清和1640培养基今天用不上,明天用,我不想放到冰箱里,放在室温下一晚行吗?100毫升培养瓶加多少培养基呢?
答:可以放4℃。ml。
血清使用时一定需要灭活么?
实验显示,经过正确处理的热灭活血清对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,乃至由于高温处理影响了血清的质量,
而造成细胞生长速率的下降。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下视察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在 7℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。若非必须,可以不需要做热处理这一步。不但节省时间,更确保血清的质量。
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